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酶可用于鉴定细菌产生的恶臭分子3

2019-03-12 02:41来源:互联网关注:作者:

近日,一个中美合作团队感受到了成功带来的甜蜜气息:他们找到一种标志性的酶,可用于鉴定细菌生的恶臭分子3-甲基吲哚——粪臭素。研究结果或有助于研发抑制这种恶臭分子活性的方法。

酶可用于鉴定细菌产生的恶臭分子3

“简单地说,我们的发现解释了动物粪便为什么会发出臭味的问题。”研究共同通讯作者、天津大学生物化学家张雁在接受《中国科学报》采访时说。尽管人们一直以来知道粪臭素是由细菌色氨酸发酵而来,但在此之前,对催化其形成的酶却并不了解。

研究人员利用比较基因组学的方法,发现吲哚乙酸脱羧酶或可作为一种遗传标记,用于鉴定产生粪臭素的环境细菌以及与人相关联的细菌。该成果增加了甘氨酰基自由基酶超级家族不断增长的化学库,将进一步对人类健康和畜牧业产生影响。

厌氧催化

“粪臭素是一种恶臭化合物,是人或动物粪便特有气味的来源。”张雁说,“当空气中的粪臭素达到0.00056ppm(百万分之一)或0.0030 mg/m3时,人的鼻子就能辨别出粪臭素独特的气味。”

粪臭素起源于细菌代谢,其产生的生化途径对了解人类健康及相关农业生产具有重要意义。厌氧细菌会将芳香氨基酸发酵成多种化合物,使其保持稳定的芳香环。当生活在厌氧环境(人/动物肠道)中的细菌产生这些化合物时,它们会在宿主体内累积,浓度达到亚毫摩尔,产生生理或病理效应。

粪臭素还能让一些猪肉制品散发出怪味(公猪膻味),导致猪肉或猪油质量差。同时,它还是一种潜在的肺毒素,可能导致肺癌以及牛呼吸道疾病。此外,粪臭素作为诱导蚊子产卵的化合物,对丝虫病、日本脑炎和西尼罗河病毒等虫媒人感染病的发生和发展起着促进作用。

“尽管这个化学反应和人类的生存环境以及畜牧业存在种种关联,但因为它对氧气非常敏感,因而了解它的催化机制具有很大的挑战性。”张雁说。他与美国伊利诺伊大学教授赵惠民、上海科技大学生命科学与技术学院iHuman研究所研究员赵素文团队等合作,聚焦研究厌氧菌里的自由基化学。

合作团队发现,细菌通过降解色氨酸生成粪臭素,这一生化途径的最后一步依赖于一种此前未知的酶——吲哚乙酸脱羧酶(IAD)。“吲哚羧酸化合物脱羧是一种自由基反应,在化学上很难实现。据我们所知,只能由IAD完成。”研究共同通讯作者赵惠民在电子邮件中告诉《中国科学报》记者。

据介绍,由于自由基没有配对的电子,很容易得到电子和失去电子,从而与任何其他物质反应,因此其寿命非常短暂,只有几毫秒甚至几微秒。“但生命进化过程中的一些酶可以通过蛋白折叠把自由基折叠到蛋白质中,从而让它不那么短命,甚至可能很稳定,催化很难的化学反应,如这项研究中的脱羧反应。”张雁说。

这篇论文中发现的新甘氨酸自由基酶——IAD正是如此。研究人员在大肠杆菌中表达了这种酶,然后喂给它一些吲哚乙酸盐,随后用气相色谱法确认所得到的“奖励”正是粪臭素。

遗传标志

未来,IAD可以作为判断粪臭素存在的标志。“在未来新测序的细菌中要鉴定该酶是否存在只需要和这些功能已知的IAD进行序列比对,看活性口袋的残基是否保守即可。”赵素文告诉《中国科学报》记者。

“在新研究中,粪臭素恰巧是挥发性的,它的强烈气味是细菌代谢旺盛的标志,并且人体也已经演化出了对这种气味的敏感。”赵惠民补充说,“基于IAD的DNA序列,人们还可以通过DNA测序快速确定人体和环境样品中是否存在粪臭素产生菌。”

在一个庞大的细菌基因组数据库中进行搜索分析后,研究小组发现了产生相同IAD的另外12种细菌。出乎意料的是,其中之一是从人口腔牙齿和牙龈之间的缝隙中分离出来的细菌。“这可以解释口臭的气味。”张雁说。

自由基酶本身对氧气非常敏感,只有在肠道无氧的环境下才能够稳定和催化。而口腔中存在氧气,最多只是厌氧环境,为什么有些菌会发生这一化学反应呢?张雁推测,这可能是因为它们形成了一种生物膜。

对于如何抑制这种化学反应,从而阻止口臭,赵素文表示,抗生素的使用现在争议较大,目前只针对某一种细菌的抗生素还很少,不论广谱还是窄谱抗生素都可以杀死多种细菌,改变人体肠道菌群的结构,进而对健康造成不良影响。“所以,最好还是养成良好的口腔卫生习惯。”她说。

阻断活性

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